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表達(dá)作用制備 專題
中文名稱 | 重組大鼠FGF-9 |
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中文同義詞 | 重組大鼠FGF-9 |
英文名稱 | Recombinant Rat Fibroblast Growth Factor-9 |
英文同義詞 | Recombinant Rat Fibroblast Growth Factor-9;rFGF-9 |
CAS號(hào) | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS號(hào) | |
相關(guān)類別 | 細(xì)胞因子;cytokine |
Mol文件 | Mol File |
結(jié)構(gòu)式 |
表達(dá)
重組大鼠成纖維細(xì)胞生長因子9(FGF9)重組蛋白原核蛋白表達(dá)系統(tǒng)以大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)為代表,具有遺傳背景清楚、成本低、表達(dá)量高和表達(dá)產(chǎn)物分離純化相對(duì)簡單等優(yōu)點(diǎn),缺點(diǎn)主要是蛋白質(zhì)翻譯后缺乏加工機(jī)制,如二硫鍵的形成、蛋白糖基化和正確折疊,得到具有生物活性的蛋白的幾率較小。
作用
FGF家族成員具有廣泛的促有絲分裂和細(xì)胞存活活性,并參與多種生物過程,包括胚胎發(fā)育,細(xì)胞生長,形態(tài)發(fā)生,組織修復(fù),腫瘤生長和侵襲。分離該蛋白質(zhì)作為分泌因子,其對(duì)培養(yǎng)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞表現(xiàn)出生長刺激作用。在神經(jīng)系統(tǒng)中,這種蛋白質(zhì)主要由神經(jīng)元產(chǎn)生,可能對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育很重要。發(fā)現(xiàn)該基因的小鼠同源物的表達(dá)依賴于Sonic hedgehog(Shh)信號(hào)。缺乏同源基因的小鼠顯示出雄性到雌性的性別逆轉(zhuǎn)表型,這表明在睪丸胚胎發(fā)生中起作用。FGF-9基因參與性別決定,肺發(fā)育和骨骼發(fā)育的模式。
制備
重組大鼠FGF-9的制備1.建立大鼠鼠FGF9的原核表達(dá)體系,獲得純化的FGF9重組蛋白,采用PCR技術(shù)擴(kuò)增FGF9,并將其克隆入原核表達(dá)載體pET30a(+)中2.經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證后將該重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21(DE3)中進(jìn)行表達(dá)3.采用親和層析技術(shù)進(jìn)行目的蛋白的純化4.并用Western blotting進(jìn)行了免疫原性驗(yàn)證。
海關(guān)編碼 | 3504009000 |
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