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概述營養(yǎng)成分使用方法應(yīng)用 專題
中文名稱 | “黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(RPMI-1640) |
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中文同義詞 | “黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(RPMI-1640) |
英文名稱 | Blackgel clear basal medium (RPMI-1640) |
英文同義詞 | Blackgel clear basal medium (RPMI-1640) |
CAS號(hào) | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS號(hào) | |
相關(guān)類別 | |
Mol文件 | Mol File |
結(jié)構(gòu)式 |
概述
“黑膠蟲”及其分解復(fù)合物是一種常見的細(xì)胞污染物,與細(xì)胞共生,隨細(xì)胞傳代而傳代,通??股貙?duì)其無效?!昂谀z蟲”與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)性生長(zhǎng),對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利,嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。目前很多細(xì)胞存在被“黑膠蟲”污染的現(xiàn)象,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)及其后續(xù)實(shí)驗(yàn)造成了極大地影響?!昂谀z蟲”污染的細(xì)胞常見的特征有以下幾點(diǎn):(1)培養(yǎng)液不渾濁,但在顯微鏡下觀察細(xì)胞時(shí),細(xì)胞周圍和培養(yǎng)液中有很多“小黑點(diǎn)”,且隨著細(xì)培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)“小黑點(diǎn)”逐漸增多,更換培養(yǎng)液或洗滌細(xì)胞不能將其去除;(2)“小黑點(diǎn)”污染的細(xì)胞,營養(yǎng)消耗快,需要頻繁更換培養(yǎng)液;(3)“黑膠蟲”污染的細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,細(xì)胞狀態(tài)差,空泡化嚴(yán)重,甚至還可能導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)的改變?!昂谀z蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(RPMI-1640)含有清除“黑膠蟲”的特殊成分,對(duì)清除“黑膠蟲”污染效果顯著,能夠很好的殺滅和抑制“黑膠蟲”。
營養(yǎng)成分
“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(RPMI-1640)含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等多種成分,但不含蛋白質(zhì)、脂類或者任何生長(zhǎng)因子需搭配血清和無血清添加物使用。
使用方法
1、根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)胞的特性,將“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(RPMI-1640)配制成相應(yīng)的完全培養(yǎng)基。
2、將50~100萬個(gè)細(xì)胞鋪到60mm的細(xì)胞培養(yǎng)皿內(nèi),加入4ml“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(RPMI-1640)孵育細(xì)胞,(也可以與細(xì)胞正常培養(yǎng)方法相同,直接將“黑膠蟲”清除完全培養(yǎng)加入到培養(yǎng)器皿中孵育細(xì)胞)。
3、次日更換新鮮的“黑膠蟲”清除完全培養(yǎng)基,并更換新的培養(yǎng)器皿;之后每2~3天更換1次培養(yǎng)液,換液時(shí)用無菌的平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞1~2次;期間如果細(xì)胞密度過大,請(qǐng)保持細(xì)胞密度適當(dāng)(貼壁細(xì)胞可能需要用胰酶消化)。
4、使用“黑膠蟲”清除培養(yǎng)基3天之后即可見清除效果,連續(xù)使用12~14天即可將“黑膠蟲”清除,若“黑膠蟲”污染較為嚴(yán)重,可延長(zhǎng)處理3~5天。
5、因環(huán)境中可能依然存在污染源,為避免細(xì)胞再次受到“黑膠蟲”的污染,建議您在“黑膠蟲”清除以后繼續(xù)使用“黑膠蟲”清除培養(yǎng)基,以達(dá)到預(yù)防的效果。
應(yīng)用
“黑膠蟲”清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基(RPMI-1640)最初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞核癌細(xì)胞的培養(yǎng),尤其是懸浮細(xì)胞的培養(yǎng),是使用最為廣泛的培養(yǎng)基之一。
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