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細(xì)胞凍存凍存原理 專題
中文名稱 | 通用細(xì)胞凍存液 |
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中文同義詞 | 通用細(xì)胞凍存液 |
英文名稱 | PhyCell Cell Freezing Liquid |
英文同義詞 | PhyCell Cell Freezing Liquid;General fluid cells cryopreserved;Cryopreservation Medium;Universal Cell Freeze |
CAS號 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS號 | |
相關(guān)類別 | 試劑;標(biāo)準(zhǔn)品 -標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 |
Mol文件 | Mol File |
結(jié)構(gòu)式 |
細(xì)胞凍存
細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細(xì)胞損傷。
凍存原理
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。如今細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。
通用細(xì)胞凍存液的使用方法同其他細(xì)胞凍存液基本一致,原則上細(xì)胞每支安瓿含1-10×106/ml。
消化到位的貼壁細(xì)胞,或最后一次離心后棄掉上清液,加入細(xì)胞凍存液,重懸、吹散沉淀的細(xì)胞,分裝入細(xì)胞凍存管,密封標(biāo)記后按常規(guī)操作流程依次經(jīng)4℃,-20℃,-80℃直至液氮罐或用程序降溫儀逐級降溫凍存。
用途
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存
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