水解酪蛋白胨(MH)肉湯

　　(Mueller Hinton Broth)

　　用 途：

　　水解酪蛋白胨(MH)肉湯適用于稀釋法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。

　　原 理：

　　牛肉浸出粉和酪蛋白水解物提供氮源、維生素和氨基酸;可溶性淀粉吸收有毒的代謝產(chǎn)物。對(duì)氨基苯甲酸及其類似物證明對(duì)磺胺起拮抗作用;胸腺嘧啶脫氧核苷降低甲氧芐氨嘧啶的活性，使其抑菌圈縮小。因此對(duì)氨基苯甲酸和胸腺嘧啶或胸腺嘧啶脫氧核苷盡量減少至最低限度。

　　培養(yǎng)基配方(每升)：

　　牛肉 300g(從中提取浸出粉)

　　可溶性淀粉 1.5g

　　酪蛋白水解物 17.5g

　　最終pH7.3±0.2

　　使用方法：(兩倍稀釋法)

　　1、稱取水解酪蛋白胨(MH)肉湯21g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min，定量(等體積)分裝于一系列滅菌試管中。

　　2、藥液稀釋：于第一管中加入同體積的藥液，以對(duì)倍稀釋法逐管稀釋藥液，于倒數(shù)第二管中取出一半體積的溶液作為空白對(duì)照，不加試驗(yàn)菌，以便觀察供試液是否被污染，最后一支管作為陽性生長對(duì)照管。

　　3、取適宜的稀釋級(jí)菌液加入到各抑菌管中，(一般接種量為每mL藥液含10—105個(gè)細(xì)菌)搖勻，使試驗(yàn)菌與藥液能充分接觸。

　　4、將各試驗(yàn)管置于36±1℃培養(yǎng)16—24h，特殊試驗(yàn)菌可適當(dāng)延長一定時(shí)間。

　　5、最低抑菌濃度(MIC)的確定：

　　經(jīng)培養(yǎng)后的試驗(yàn)管呈現(xiàn)澄明，搖勻后仍澄清者，認(rèn)為該管無菌生長，若培養(yǎng)管呈現(xiàn)混濁狀態(tài)，表明有菌生長。從無菌生長的各管中找出最低濃度的試驗(yàn)管，該管的藥物濃度即為最低抑菌濃度。

　　6、最低殺菌濃度(MBC)的確定：

　　當(dāng)藥物濃度在稍高于MIC值濃度下的抑菌作用是不可逆的，稱為殺菌作用。最低殺菌濃度的確定即依次將未見細(xì)菌生長和各管各吸取適量涂布于合適的瓊脂培養(yǎng)基平板上，在規(guī)定的溫度下培養(yǎng)18—24h，平板上的菌落數(shù)小于5個(gè)的最小稀釋度的藥物濃度即為最低殺菌濃度。

　　質(zhì)量控制：

　　質(zhì)控菌株添加下列抗菌素后，于36±1℃培養(yǎng)16—24h后抑菌濃度如下：

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

　　規(guī) 格：100g