CRM006 阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基

　　(Chromogenic Enterbacter Sakazakii Agar)

　　用 途：

　　阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基供嬰兒奶粉以及其它食品中阪崎腸桿菌的鑒定和計(jì)數(shù)。(GB4789.40-2010和SN/T 1632-2005，ISO標(biāo)準(zhǔn))

　　原 理：

　　蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;膽鹽抑制革蘭氏陽(yáng)性菌，氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生;顯色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷與阪崎腸桿菌中的α-葡萄糖苷酶發(fā)生反應(yīng)，水解底物，釋放出5-溴-4-氯-3-吲哚基顯色基團(tuán)，在淡黃色平板上產(chǎn)生綠-藍(lán)綠色的菌落。

　　阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基配方(每升)：

　　蛋白胨 11g

　　牛肉膏粉 5g

　　氯化鈉 5g

　　檸檬酸鐵銨 　 1g

　　硫代硫酸鈉 1g

　　膽鹽 1.5g

　　5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷 0.1g

　　瓊脂 15g

　　最終pH 7.3±0.2

　　使用方法:

　　1. 取瓶?jī)?nèi)干粉39.6克，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min;冷卻至50℃，搖勻倒平板。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數(shù)天(避光，4℃)。

　　2. 取樣品333克按MPN三管法分別取100克、10克和1克分裝在各三個(gè)2000ml、250ml和100ml的三角瓶中，在三角瓶中已裝有經(jīng)45℃預(yù)熱的9/10(樣品為1/10)的無(wú)菌蒸餾水或緩沖蛋白胨水，搖勻，在36℃培養(yǎng)18-22小時(shí)(SN和FDA方法)。

　　3. 各取10ml上述懸浮液加到裝有90mlEE肉湯(022160)/mLST-Vm(022212)的150mL的三角瓶中，在36℃/44℃增菌培養(yǎng)18-22小時(shí)。

　　4. 用劃線或涂布法把混勻的肉湯接種到阪崎腸桿菌顯色瓊脂平板上，35-37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。

　　5. 可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗(yàn)，對(duì)疑似阪崎腸桿菌菌落進(jìn)行生化鑒定。

　　質(zhì)量控制：

　　本品傾注平皿后呈淡黃色，下列菌株接種后36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)生長(zhǎng)情況如下表：

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。

　　規(guī) 格：可配置1L的培養(yǎng)基干粉。

　　參考文獻(xiàn)：

　　1.GB/T4789.40-2008 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)

　　2.GB 4789.40-2010 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)

　　3.SN/T 1632.1-2005 中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 奶粉中阪崎腸桿菌檢驗(yàn)方法 第1部分 分離與計(jì)數(shù)方法

　　4.SN/T 1632.2-2005 中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 奶粉中阪崎腸桿菌檢驗(yàn)方法 第2部分 PCR方法

　　5.ISO22964-2006 Milk  milk products-Detection of Enterobacter sakazakii