詳細說明
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基
(Chromogenic Enterbacter Sakazakii Agar)
用 途:
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基供嬰兒奶粉以及其它食品中阪崎腸桿菌的鑒定和計數(shù)。(GB4789.40-2010和SN/T 1632-2005,ISO標準)
原 理:
蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;膽鹽抑制革蘭氏陽性菌,氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫的產(chǎn)生;顯色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷與阪崎腸桿菌中的α-葡萄糖苷酶發(fā)生反應,水解底物,釋放出5-溴-4-氯-3-吲哚基顯色基團,在淡黃色平板上產(chǎn)生綠-藍綠色的菌落。
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基配方(每升):
蛋白胨 11g
牛肉膏粉 5g
氯化鈉 5g
檸檬酸鐵銨 1g
硫代硫酸鈉 1g
膽鹽 1.5g
5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷 0.1g
瓊脂 15g
最終pH 7.3±0.2
使用方法:
1. 取瓶內阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基干粉39.6克,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min;冷卻至50℃,搖勻倒平板。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數(shù)天(避光,4℃)。
2. 取樣品333克按MPN三管法分別取100克、10克和1克分裝在各三個2000ml、250ml和100ml的三角瓶中,在三角瓶中已裝有經(jīng)45℃預熱的9/10(樣品為1/10)的無菌蒸餾水或緩沖蛋白胨水,搖勻,在36℃培養(yǎng)18-22小時(SN和FDA方法)。
3. 各取10ml上述懸浮液加到裝有90mlEE肉湯(022160)/mLST-Vm(022212)的150mL的三角瓶中,在36℃/44℃增菌培養(yǎng)18-22小時。
4. 用劃線或涂布法把混勻的肉湯接種到阪崎腸桿菌顯色瓊脂平板上,35-37℃培養(yǎng)18-24小時。
5. 可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗,對疑似阪崎腸桿菌菌落進行生化鑒定。
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基質量控制:
本品傾注平皿后呈淡黃色,下列菌株接種后36±1℃培養(yǎng)18-24小時生長情況如下表:
貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。
規(guī) 格:可配置1L的培養(yǎng)基干粉。
參考文獻:
1.GB/T4789.40-2008 中華人民共和國國家標準 食品衛(wèi)生微生物學檢驗 阪崎腸桿菌檢驗
2.GB 4789.40-2010 中華人民共和國國家標準 食品安全國家標準 食品衛(wèi)生微生物學檢驗 阪崎腸桿菌檢驗
3.SN/T 1632.1-2005 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準 奶粉中阪崎腸桿菌檢驗方法 第1部分 分離與計數(shù)方法
4. SN/T 1632.2-2005 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準 奶粉中阪崎腸桿菌檢驗方法 第2部分 PCR方法
5.ISO22964-2006 Milk milk products-Detection of Enterobacter sakazakii