大腸菌群顯色培養(yǎng)基

　　(Chromogenic Coliform Agar)

　　用　　途：

　　大腸菌群顯色培養(yǎng)基用于大腸菌群的快速檢測和計數(shù)。

　　原 理：

　　蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;十二烷基硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌;顯色底物與大腸菌群β-半乳萄糖苷酶發(fā)生特異性反應(yīng)，水解底物，釋放出顯色基團(tuán)，在淡黃色平板上產(chǎn)生綠色的菌落。

　　配方(每升)：

　　大腸菌群顯色培養(yǎng)基使用方法：

　　1、稱取大腸菌群顯色培養(yǎng)基32.8g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，無需高壓滅菌。

　　2、以無菌手續(xù)取樣品25g或25mL，加入含225mL無菌磷酸鹽緩沖液(或生理鹽水)的三角瓶內(nèi)，充分振搖或用均質(zhì)器均質(zhì)1min成1：10稀釋液，然后以1：10繼續(xù)稀釋，選擇三個適宜的連續(xù)稀釋度，每個稀釋度接種兩個平皿。

　　3、采用傾注法：將培養(yǎng)基水浴冷卻至約50℃，準(zhǔn)備直徑90mm已滅菌平皿，每個培養(yǎng)皿接種1ml樣品，然后傾注約15ml上述溶解的培養(yǎng)基，混勻使其凝固，倒置，37℃培養(yǎng)24小時。

　　4、 采用表面接種法：冷卻至約50℃，搖勻?qū)⑴囵B(yǎng)基傾注于已滅菌平皿中。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數(shù)天(避光，4℃)。樣品用劃線接種法或濾膜法，37℃培養(yǎng)24小時。

　　5、觀察結(jié)果。

　　質(zhì)量控制：

　　本品傾注平皿后呈淡黃色，下列菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)18～24h生長情況如下表。

　　貯 存：貯存于10-30℃，避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。

　　規(guī) 格：可配置1L的培養(yǎng)基干粉。