產(chǎn)品介紹:

  大腸桿菌O157：H7顯色培養(yǎng)基是青島海博生物公司改良的培養(yǎng)基，用于食品、病人糞便樣品中O157：H7菌的快速檢測(cè)。O157：H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色，菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈，大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色，菌落周圍有藍(lán)色暈圈；其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色。本培養(yǎng)基的特異性高，可以克服SMAC培養(yǎng)基引起的假陽性和假陰性結(jié)果，是一種很理想的快速檢測(cè)培養(yǎng)基。

成份(g/L)      

特殊營養(yǎng)物質(zhì) 68.4混合顯色劑  2.6瓊脂 15.0pH7.0±0.1  25℃       

CT添加劑  1ml/支*5（已配套，無需另購）      

 此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果。

用法      

 稱取本品 17.2g 加入 200ml 蒸餾水，加熱煮沸溶解并不停攪拌，加熱 2 分鐘左右。冷卻至 45-50℃ 時(shí)，加入一支CT添加劑混勻，傾入無菌平皿。

 注意：制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥，可在 36℃ 的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時(shí)。

 培養(yǎng)基的加熱滅菌操作視頻：http://www.hopebiol.com/video/jiaremiejun.asp

原理
  利用大腸桿菌O157 自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)使菌落顯色，以區(qū)分目標(biāo)菌與非目標(biāo)菌。顯色底物是由產(chǎn)色因子和微生物部分可代謝物質(zhì)組成，在特異性酶作用下，游離出產(chǎn)色因子使菌落顯示一定顏色。

操作步驟    
  1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；    
  2、取 25 克樣品液加入 225ml  mEC肉湯或mTSB肉湯中，36℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時(shí)；    
  3、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液，劃線接種到O157菌顯色培養(yǎng)基上，做 2 個(gè)平板；    
  4、36℃ 培養(yǎng) 18-24h，O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色，菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈；大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色，菌落周圍有藍(lán)色暈圈；其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色；    
  5、對(duì)典型菌落可做O157:H7菌血清學(xué)試驗(yàn)和全套生化試驗(yàn)。    
  注：必須在 36℃ 培養(yǎng) 24 小時(shí)內(nèi)判讀結(jié)果，以免菌落顏色發(fā)生變化。    
     質(zhì)量控制    
  1、外觀    
  此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動(dòng)性，呈灰白色。制備好的平板呈藍(lán)色固體培養(yǎng)基。    
  2、微生物試驗(yàn)    
  在 36℃ 培養(yǎng) 18-24h 小時(shí)：

 質(zhì)控菌株  ATCC  生長情況  菌落顏色  大腸桿菌O157 35150 +++ 亮紅色 金黃色葡萄球菌 25923 -/+ 黃色或無色 大腸桿菌 25922 +/- 暗藍(lán)色，菌落周圍有藍(lán)色暈圈 沙門氏菌 14028 +++ 藍(lán)色 奇異變形桿菌 12453 +/- 無色 肺炎克雷伯氏菌 10031 +/- 藍(lán)色，菌落周圍有藍(lán)色暈圈 弗氏檸檬酸鹽桿菌 43864 +/- 藍(lán)色菌落有紫色中心，菌落周圍有藍(lán)色暈圈 坂崎桿菌 29004 ++ 紫色至藍(lán)色

方法的局限性      
  本培養(yǎng)基上的典型大腸桿菌O157:H7必須做血清學(xué)試驗(yàn)或生化試驗(yàn)。      
      典型特征      
  典型大腸桿菌O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色，菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈；大腸桿菌和大腸菌群顯藍(lán)色或紫色，菌落周圍有藍(lán)色暈圈；其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色；    O157顯色培養(yǎng)基大腸埃希氏菌O157：H7 ATCC35150O157顯色培養(yǎng)基大腸埃希氏菌O157：H7 ATCC43888

貯存

  制備好的平板可保存 2-5 天，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8℃，注意避光保存。      
      失效      
  干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。      
      注意      
  此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。      
      參考文獻(xiàn)      
    1、Rappaport, F., and E. Henig. 1952. Media for the isolation and differentiation of pathogenic Escherichia coli (serotypes 0111 and 055). J. Clin. Pathol. 5:361-362.      
          2、 U.S. Food and Drug Administration. 1995. Bacteriological analytical manual, 8 th ed., AOAC International, Gaithersburg, MD. 

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顯色平板菌落特征        

O157顯色培養(yǎng)基的        微生物靈敏度試驗(yàn):        

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。