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碧云天生產(chǎn)的蘇木素染色液(Hematoxylin Staining Solution)綜合了多種經(jīng)典的蘇木素染色方法，例如Harris法、Mayer法等，簡化了操作步驟，縮短了操作時間，并且染色液內(nèi)不使用汞、甲醇等有毒試劑?？梢杂糜诮M織切片或培養(yǎng)細胞的染色。

蘇木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining)，也被稱作蘇木精染色，是最常用的組織和細胞的染色方法之一。無色的蘇木素(hematoxylin)氧化后形成有醌環(huán)結(jié)構(gòu)(quinoid ring)的氧化蘇木素(hematein or haematein)，從而可以和三價的鋁離子、鐵離子等形成有顏色的帶正電荷的復(fù)合物(如hematein-Al³⁺ complexes)。氧化蘇木素(也稱氧化蘇木精)和鋁離子等形成有色的復(fù)合物的過程也被稱為Dye Lake Formation。細胞核內(nèi)基因組DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，雙鏈上的磷酸基團向外，帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的氧化蘇木素復(fù)合物結(jié)合，從而形成細胞核染色。蘇木素染色液有多種不同的配制方法，不同的方法可以把細胞核染色成不同深淺的藍色或藍紫色。

本蘇木素染色液染色后細胞核呈藍色，本產(chǎn)品用于石蠟切片染色的效果圖參考圖1。

圖1. 本產(chǎn)品用于小鼠睪丸石蠟切片的染色效果圖。右圖為左圖局部放大圖片。圖中可見非常清晰的細胞核著色。本圖僅作參考，不同的樣品不同的檢測條件，實際獲得的結(jié)果可能有所差別。Scale bar, 100μm。

本染色液可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在本蘇木素染色液染色后進行免疫熒光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫組化染色后再進行蘇木素復(fù)染。

本染色液可以重復(fù)使用，直至認為效果不佳時再換用新的染色液。一個100ml包裝的本染色液至少可以染色200個樣品，一個500ml包裝的本染色液至少可以染色1000個樣品。

包裝清單：  
   

保存條件：  
   

室溫避光保存，至少一年有效。

注意事項：  
   

染色后的分化為選做步驟，但分化后細胞核著色更清晰。

染色液可以重復(fù)使用多次，認為效果不佳時再更換新的染色液。

樣品數(shù)量較多時，可以使用碧云天生產(chǎn)的染色架和染色缸，便于操作。

第一次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預(yù)實驗。

本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明：    
    1.需要用戶自己準備的試劑    
a.固定液：碧云天的    免疫染色固定液(P0098)，或    4%多聚甲醛固定液(P0099)。    
b.分化液(碧云天的鹽酸乙醇分化液(    C0161、    C0163、    C0165)或5%的乙酸溶液或0.5%的鹽酸乙醇)；    
c.如果需要脫水、透明和封片處理，還需自備二甲苯，和封片劑(如碧云天的    C0185 PVP封片液、    P0126 抗熒光淬滅封片液或中性樹膠等其它封片劑)，及80%乙醇、90%乙醇、無水乙醇；    
d.70%乙醇。    
    2.樣品處理    
    a.對于石蠟切片：    
二甲苯中脫蠟5-10分鐘。    
換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。    
無水乙醇5分鐘。    
90%乙醇2分鐘。    
80%乙醇2分鐘    
70%乙醇2分鐘。    
蒸餾水2分鐘。    
    b.對于冰凍切片：    
固定液固定10分鐘以上。    
蒸餾水2分鐘。    
    c.對于培養(yǎng)細胞：    
固定液固定10分鐘以上。    
蒸餾水洗滌2分鐘。    
換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。    
    3.蘇木素染色    
對于上述處理好的樣品：    
a.蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間)。    
b.浸自來水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。    
c.蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。    
d.選做：根據(jù)不同分化液的分化時間，分化約2-30秒，自來水沖洗10分鐘。    
此時，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進行脫水、透明和封片處理。 注：如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染，可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進行蘇木素染色。    
    4.脫水、透明、封片或進行其它染色    
    a.脫水、透明、封片：    
70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，無水乙醇10秒。二甲苯透明5分鐘。    
換用新鮮的二甲苯，再透明5分鐘。    
用中性樹膠或其它封片劑封片。    
顯微鏡下觀察，細胞核呈藍色。    
    b.進行其它染色：    
如果進行免疫熒光染色，或進行Hoechst等熒光染料的染色，在蘇木素染色液染色后：    
70%乙醇洗滌2次，每次2分鐘。    
PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。    
然后就可以進行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。如果免疫熒光染色效果不佳，可能染料對抗體結(jié)合有影響，請單獨染色。    
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