產(chǎn)品簡介：

    碧云天生產(chǎn)的細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一種采用經(jīng)典的碘化丙啶染色(Propidium staining，即PI staining)方法進行細胞周期與細胞凋亡分析的檢測試劑盒。
    碘化丙啶(Propidium，簡稱PI)是一種雙鏈DNA的熒光染料。碘化丙啶和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒
光，并且熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比。細胞內(nèi)的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式細胞儀對細胞進行DNA含量測定，然后根據(jù)DNA含量的分布情況，可以進行細胞周期和細胞凋亡分析。
    碘化丙啶染色后，假設(shè)G0/G1期細胞的熒光強度為1，那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細胞的熒光強
度的理論值為2，正在進行DNA復(fù)制的S期細胞的熒光強度為1-2之間。凋亡細胞由于細胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA片段化(DNA fragmentation)導(dǎo)致部分基因組DNA片斷在染色過程中丟失，因此凋亡細胞碘化丙啶染色后呈現(xiàn)明顯的弱染，即熒光強度小于1，在流式檢測的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1峰，即凋亡細胞峰。
    細胞發(fā)生凋亡時，由于胞漿和染色質(zhì)濃縮、核碎裂，產(chǎn)生凋亡小體，使細胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變
化。在細胞凋亡的早期，細胞對前向角光散射的能力顯著降低，對側(cè)向光散射的能力增加或沒有變化。在細胞凋亡的晚期，前向和側(cè)向光散射的信號均降低。因此可通過流式細胞儀測定細胞光散射的變化觀察細胞凋亡情況。
    本試劑盒通常應(yīng)用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細胞的細胞周期與細胞凋亡檢測。如果用于組織的細胞周期
與細胞凋亡檢測，則必須把組織消化成單細胞狀態(tài)，才可以進行檢測。
    本試劑盒足夠檢測50個樣品，每個樣品的細胞數(shù)量可以為10-100萬。
包裝清單：

保存條件：
    -20℃保存，一年有效。C1052-2碘化丙啶染色液(20X)需避光保存。本試劑盒可4℃保存，一個月內(nèi)
有效。
注意事項：
    本試劑盒需使用流式細胞儀進行檢測。
    需自備PBS和70%乙醇，PBS(C0221A)可以向碧云天訂購。
    熒光染料均存在淬滅問題，保存和使用過程中請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
    碘化丙啶對人體有刺激性，請注意適當(dāng)防護。
    為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明：
1. 細胞樣品的準(zhǔn)備：
   a. 對于貼壁細胞：小心收集細胞培養(yǎng)液到一離心管內(nèi)備用。用胰酶消化細胞，至細胞可以被輕輕用移
      液管或槍頭吹打下來時，加入前面收集的細胞培養(yǎng)液，吹打下所有的貼壁細胞，并輕輕吹散細胞。
      再次收集到離心管內(nèi)。1000g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充
      分，可以適當(dāng)延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的培養(yǎng)液，
      以避免吸走細胞。加入約1毫升冰浴預(yù)冷的PBS，重懸細胞，并轉(zhuǎn)移到1.5毫升離心管內(nèi)。再次離
      心沉淀細胞，小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的PBS，以避免吸走細胞。輕輕彈擊離心管
      底以適當(dāng)分散細胞，避免細胞成團。
   b. 對于懸浮細胞：1000g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充分，可以
      適當(dāng)延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的培養(yǎng)液，以避免吸
      走細胞。加入約1毫升冰浴預(yù)冷的PBS，重懸細胞，并轉(zhuǎn)移到1.5毫升離心管內(nèi)。再次離心沉淀細胞，
      小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的PBS，以避免吸走細胞。輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細
      胞，避免細胞成團。
2. 細胞固定：加入1毫升冰浴預(yù)冷70%乙醇中，輕輕吹打混勻，4℃固定2小時或更長時間。固定12-24小時
   可能效果更佳。1000g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適
   當(dāng)延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的70%乙醇，以避免吸走
   細胞。加入約1毫升冰浴預(yù)冷的PBS，重懸細胞。再次離心沉淀細胞，小心吸除上清，可以殘留約50微
   升左右的PBS，以避免吸走細胞。輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細胞，避免細胞成團。
3. 碘化丙啶染色液的配制：參考下表，根據(jù)待檢測樣品的數(shù)量配制適量的碘化丙啶染色液：