詳細(xì)說(shuō)明
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
碧云天生產(chǎn)的一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)為您提供了一種高靈敏度又快速簡(jiǎn)便的細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法。對(duì)于經(jīng)過(guò)固定和洗滌的細(xì)胞或組織,只要經(jīng)過(guò)一步染色反應(yīng),洗滌后就可以通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)到呈現(xiàn)紅色熒光的凋亡細(xì)胞。
細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測(cè),可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder?;蚪MDNA斷裂時(shí),暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上紅色熒光探針Cy3(Cyanine 3)標(biāo)記的dUTP,從而可以通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè),這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理。
本試劑盒有如下優(yōu)點(diǎn)。(1)高靈敏度:背景染色極低,陽(yáng)性染色明亮,可以在單細(xì)胞水平檢測(cè)到細(xì)胞凋亡,同時(shí)由于凋亡早期就有DNA斷裂,可以檢測(cè)到早期的細(xì)胞凋亡。(2)特異性:TUNEL檢測(cè)時(shí)通常更容易標(biāo)記凋亡細(xì)胞,而不容易標(biāo)記壞死細(xì)胞。(3)快速:僅需約1-2個(gè)小時(shí)即可完成。(4)方便:只需一步染色反應(yīng),洗滌后即可觀察,不必使用二抗等進(jìn)行多步操作。(5)應(yīng)用范圍廣:可以用于檢測(cè)冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況,也可以檢測(cè)培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。
TUNEL法特異性檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)產(chǎn)生的DNA斷裂,但不會(huì)檢測(cè)出射線等誘導(dǎo)的DNA斷裂(和細(xì)胞凋亡時(shí)的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開(kāi),另一方面也不會(huì)把射線等誘導(dǎo)發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細(xì)胞判斷為凋亡細(xì)胞。
極少數(shù)細(xì)胞凋亡時(shí)沒(méi)有DNA斷裂,此時(shí)不適用TUNEL法檢測(cè)。在個(gè)別類型的壞死細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)TUNEL檢測(cè)呈陽(yáng)性。在需要嚴(yán)格判斷細(xì)胞凋亡的情況下,最好同時(shí)檢測(cè)多個(gè)凋亡指標(biāo)。
本試劑盒足夠檢測(cè)20個(gè)樣品。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
C1089-1 | TdT酶 | 40μl |
C1089-2 | 熒光標(biāo)記液 | 960μl |
C1089-3 | TdT酶稀釋液(選用) | 500μl |
— | 說(shuō)明書 | 1份 |
保存條件:
-20℃保存,熒光標(biāo)記液需避光保存。
注意事項(xiàng):
需自備用于洗滌細(xì)胞的PBS或HBSS,用于封片的抗熒光淬滅封片液(P0126),用于固定的4%多聚甲醛或向碧云天訂購(gòu)免疫染色固定液(P0098),同時(shí)需自備含0.1% Triton X-100的PBS或向碧云天訂購(gòu)免疫染色洗滌液(P0106)。
如果用于石蠟切片的檢測(cè),需自備蛋白酶K,二甲苯。蛋白酶K(ST533)可以向碧云天訂購(gòu)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說(shuō)明: |