產(chǎn)品簡介：

    碧云天生產(chǎn)的細(xì)胞凋亡－Hoechst染色試劑盒(Hoechst Staining Kit)為您提供了一種經(jīng)典而又快速簡便的細(xì)胞凋亡檢測方法。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，染色質(zhì)會(huì)固縮。所以Hoechst 33258染色后，在熒光顯微鏡下觀察，正常細(xì)胞的細(xì)胞核呈正常的藍(lán)色，而凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核會(huì)呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染，顏色有些發(fā)白。典型的Hoechst 33258染色后的細(xì)胞圖片參考下圖。
                    
                   正常細(xì)胞核               刺激后有致密濃染的凋亡細(xì)胞
    只需25分鐘即可完成細(xì)胞凋亡檢測的整個(gè)過程。
    本試劑盒提供了固定液，染色液，及抗熒光淬滅封片液。
    本試劑盒對貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞和組織切片均適用。
    足夠檢測100個(gè)樣品。
包裝清單：

保存條件：
    4℃保存，Hoechst 33258染色液需4℃避光保存。本試劑盒自訂購之日起六個(gè)月內(nèi)有效。
注意事項(xiàng)：
    需可以觀察藍(lán)色熒光的熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡。
    需PBS或0.9%NaCl溶液。
    需自備蓋玻片與載玻片。蓋玻片與載玻片可以向碧云天訂購。
    熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，染色后的樣品宜避光保存?？梢韵虮淘铺爝x購各種型號(hào)的載玻片存儲(chǔ)盒。
    在使用抗淬滅封片液的情況下可以減緩淬滅，但仍宜盡量避光。
    為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明：
1．貼壁細(xì)胞
  A.取潔凈蓋玻片在70%乙醇中浸泡5分鐘或更長時(shí)間，無菌超凈臺(tái)內(nèi)吹干或用無菌的PBS或0.9%NaCl等溶
    液洗滌三遍，再用細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌一遍。將蓋玻片置于六孔板內(nèi)，種入細(xì)胞培養(yǎng)過夜，使約為50%-
    80%滿。
  B.刺激細(xì)胞發(fā)生凋亡后，吸盡培養(yǎng)液，加入0.5ml 固定液，固定10分鐘或更長時(shí)間(可4℃過夜)。
  C.去固定液，用PBS或0.9%NaCl 洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時(shí)宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)。
  D.加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分鐘。也宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)數(shù)次。
  E.去染色液，用PBS或0.9%NaCl 洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時(shí)宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)。
  F.滴一滴抗熒光淬滅封片液于載玻片上，蓋上貼有細(xì)胞的蓋玻片，讓細(xì)胞接觸封片液，盡量避免氣
    泡。
  G.熒光顯微鏡可檢測到呈藍(lán)色的細(xì)胞核。激發(fā)波長350nm左右，發(fā)射波長460nm左右，圖譜請參考下
    圖。
2.懸浮細(xì)胞
  A.離心收集細(xì)胞樣品于1.5ml離心管內(nèi)，加入0.5ml 固定液，緩緩懸起細(xì)胞，固定10分鐘或更長時(shí)
    間(可4℃過夜)。
  B.離心去固定液，用PBS或0.9%NaCl 洗兩遍，每次3分鐘。洗滌期間手動(dòng)晃動(dòng)數(shù)次。
  C.離心后吸去大部分液體保留約50μl液體，再緩緩懸起細(xì)胞，滴加至載玻片上，盡量使細(xì)胞分布均
    勻。
  D.稍晾干，使細(xì)胞貼在載玻片上不易隨液體流動(dòng)。
  E.均勻滴上0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分鐘。用吸水紙從邊緣吸去液體，微晾干。
  F.去染色液，用PBS或0.9%NaCl 洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時(shí)宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)。
  G.滴一滴抗熒光淬滅封片液于載玻片上，蓋上一潔凈的蓋玻片，盡量避免氣泡。
  H.熒光顯微鏡可檢測到呈藍(lán)色的細(xì)胞核。激發(fā)波長350nm左右，發(fā)射波長460nm左右，圖譜請參考下
    圖。
3.組織切片
  A.常規(guī)包埋切片后，根據(jù)切片的不同類型，處理至可以用于免疫組化染色。
  B.PBS或0.9%NaCl 洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時(shí)宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)?？稍诹装逯?br/>    操作。
  C.加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分鐘。也宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)數(shù)次。
  D.去染色液，用PBS或0.9%NaCl 洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時(shí)宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)。
  E.小心將切片置于載玻片上，滴一滴抗淬滅封片液，蓋上一潔凈的蓋玻片，盡量避免氣泡。
  F.熒光顯微鏡可檢測到呈藍(lán)色的細(xì)胞核。激發(fā)波長350nm左右，發(fā)射波長460nm左右，圖譜請參考下
    圖。
              
           Hoechst 33258的吸收光譜和發(fā)射光譜，左側(cè)峰為吸收光譜，右側(cè)峰為發(fā)射光譜。