Serum-free Cell Freezing Medium 

無血清細胞凍存液

產(chǎn)品簡介：

本品含有DMSO、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分，適用于各種常見和腫瘤動物細胞株，凍存的細胞可在-80℃長期保存，無需經(jīng)過程序性降溫過程。

本品的配方成分明確，不含有動物來源的蛋白，不含血清，可減少各類細菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全，且適合無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。

使用方法：

細胞凍存步驟

1、 常規(guī)方法收集對數(shù)期的貼壁細胞或者懸浮細胞于試管中。

2、 根據(jù)培養(yǎng)細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存的細胞數(shù)。

3、 將所需數(shù)目的細胞懸浮液置于離心管中，1000rmp離心5分鐘，收集培養(yǎng)細胞沉淀，徹底棄去離心管中的上清液。

4、 加入適量的本凍存液于離心管中，使細胞濃度約為5*105-1*107/ml。輕柔地混勻細胞，制成細胞混合液。

5、 將離心管中的細胞混合液分裝于已標記的凍存管中，建議每管1ml或1.5ml。

6、 直接將分裝好的細胞凍存管置于-80℃超低溫冰箱中，可長期保存。

7、 若需液氮長期保存，需先置于-80℃至少一天后方可轉至液氮罐中。

凍存細胞復蘇步驟

1、 從冰箱中取出凍存的細胞，立即置于37℃水浴槽中快速解凍。

2、 待凍存管中的細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于凍存管中與細胞混合，將其中的混合液移至含有約5ml該細胞培養(yǎng)基的離心管中，1000rmp離心5分鐘，收集凍存細胞沉淀，移去上清液（注意勿將細胞沉淀倒掉）。

3、 加入適量的新鮮培養(yǎng)基，使用移液管緩緩加入細胞沉淀中，輕柔混勻，將混勻好的細胞移至事先準備好的培養(yǎng)容器中。

4、 鏡檢觀察，待細胞狀態(tài)恢復后可進行其他研究或者培養(yǎng)處理。

注意事項：

1、 本品可用于常規(guī)細胞的凍存，-80℃可長期保存，細胞的存活率在90-98%。

2、 使用本產(chǎn)品加入細胞后，應盡量減少室溫存放時間，并盡快移至-80℃保存。

3、 對于干細胞（ES細胞）、原代等細胞凍存時，建議使用前，先對所要凍存的細胞進行至少1周以上的試驗性凍存培養(yǎng)，確認效果后再正式大批量凍存。

4、 本品含有10%DMSO，部分對DMSO敏感的細胞，建議先進行預實驗，確認效果后再大量正式使用。

5、 對于沒有保種的新的細胞類型，使用本品時建議凍存部分細胞于含血清的凍存液中，以避免可能的意外情況。

6、 取用凍存液均要在超凈工作臺內無菌操作 。

7、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

保存條件：常溫運輸，短期4℃保存，有效期一年；長期-20℃保存，有效期兩年。