產(chǎn)品介紹:

  弧菌顯色培養(yǎng)基是青島海博生物公司改良的培養(yǎng)基，用于食品、海產(chǎn)品、病人糞便樣品和水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的快速檢測。副溶血性弧菌顯藍(lán)綠色且菌落比較大，霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色；其它細(xì)菌絕大部分被抑制。本培養(yǎng)基的特異性高，可以克服TCBS培養(yǎng)基引起的假陰性結(jié)果，是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基。
成份(g/L)
 

 特殊營養(yǎng)物質(zhì)   75.0  混合顯色劑   4.45  瓊脂   15.0  pH 8.6±0.1  25℃      

此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果。 

用法

  稱取本品 18.9g 加入 200ml 蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌，煮沸3-5次。冷卻至 45-50℃ 時(shí)，傾入無菌平皿。
  注意：制備好的培養(yǎng)基表面不能太干燥。

原理
  利用弧菌自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)使菌落顯色，以區(qū)分目標(biāo)菌與非目標(biāo)菌。顯色底物是由產(chǎn)色因子和微生物部分可代謝物質(zhì)組成，在特異性酶作用下，游離出產(chǎn)色因子使菌落顯示一定顏色。

操作步驟
  1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；
  2、取 1ml 樣品液加入 9ml SCPB肉湯或堿性蛋白胨水中，36±1℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時(shí)；
  3、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液，劃線接種到弧菌顯色培養(yǎng)基上，做 2 個(gè)平板；
  4、36±1℃培養(yǎng) 18-24h，副溶血性弧菌顯藍(lán)綠色，菌落比較大；霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色，其它細(xì)菌絕大部被抑制；
  5、對(duì)可疑菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上，36±1℃ 培養(yǎng) 12-16 小時(shí)，挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗(yàn)。

質(zhì)量控制
  1、外觀

      此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動(dòng)性，呈淡黃色。制備好的平板呈淡粉色至黃色固體培養(yǎng)基。
  2、微生物試驗(yàn)
      在36±1℃培養(yǎng)18-24h小時(shí)

質(zhì)控菌株  菌株編號(hào)  生長情況  菌落顏色 副溶血性弧菌 ATCC 17802 +++ 藍(lán)綠色，菌落比較大  金黃色葡萄球菌 ATCC 25923 -  - 大腸桿菌 ATCC 25922 -  - 溶藻弧菌 ATCC 17749 +++ 淡黃色或米黃色 非01群霍亂弧菌    +++  紫紅色 創(chuàng)傷弧菌 ATCC 27562 +++ 紫紅色

方法的局限性
  本培養(yǎng)基不能直接鑒定霍亂弧菌，副溶血性弧菌的特異性可達(dá) 95%，準(zhǔn)確性非常高，有時(shí)可能需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。
典型特征
  典型副溶血性弧菌顯藍(lán)綠色且菌落比較大，霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色

貯存
  制備好的平板可保存 2-5 天，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8℃，注意避光保存。
失效
  干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
注意
  此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。
參考文獻(xiàn)
  1、Kobayashi, T., S. Enomoto, R. Sakazaki, and S. Kuwahara. 1963. A new selective medium for pathogenic vibrios, TCBS(modified Nakanishi's agar). Jpn, J. Bacteriol. 18:387.
  2、Nakanishi, Y. 1963. An isolation agar medium for cholerae and enteropathogenic halophilic vibrios. Modern Media. 9:246.
  3、Baron, E. J., L. R. Peterson, and S. M. Finegold. 1994. Vibrio and related species, Aeromonas, Plesiomonas, Campylobacter,Helicobacter, and others, p. 429-444. Bailey & Scott's diagnostic microbiology, 9 th ed. Mosby-Year Book, Inc. St. Louis, MO.

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顯色平板菌落特征      

弧菌顯色培養(yǎng)基的      微生物靈敏度試驗(yàn):      

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。      

副溶血性弧菌的初步檢測視頻：http://www.hopebiol.com/video/fuhuchubu.asp