詳細說明
針對種屬:mouse
質(zhì)粒由來源于 GeCKO (v2)庫的MATH-120 nt向?qū)NA組成。
向?qū)NA指導Cas9蛋白去誘導基因組DNA中的位點專一的雙鏈破裂(DSB)
基因的敲除或者激活可以使用 MATH-1 Antibody (18A6): sc-136173分析
除慢病毒激活顆粒外,其他產(chǎn)品均為轉(zhuǎn)染即用型純化DNA質(zhì)粒。慢病毒激活顆粒預包被成慢病毒顆粒的形式,適用于難被轉(zhuǎn)染的細胞
CRISPR/Cas9 KO Plasmid
Description
20 µg 純化的即用型的質(zhì)粒DNA,最多可供20次轉(zhuǎn)染
為保證最大敲除效率,MATH-1 CRISPR/Cas9 敲除質(zhì)粒 (m) 包含三個質(zhì)粒,每個質(zhì)粒都編碼Cas9 核酶和 MATH-1-特異性20nt向?qū)NA.
gRNA 序列來源于 GeCKO (v2)文庫,指導Cas9蛋白去誘導基因組DNA雙鏈中一個特異位點的斷裂。
**** 注意: 這個敲除質(zhì)粒沒有相應的HDR質(zhì)粒. **** 如果需要用嘌呤霉素篩選細胞,請選擇 sc-419230-KO-2 和 sc-419230-HDR-2。
轉(zhuǎn)染后,基因敲除效率可以用抗體:MATH-1: sc-136173,通過WB, IF或者IHC分析
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Double Nickase Plasmids
Description
20 µg 純化的即用型的質(zhì)粒DNA,最多可供20次轉(zhuǎn)染
MATH-1 雙切口酶質(zhì)粒(m)含有一對質(zhì)粒,分別編碼D10A突變的Cas9核酸酶,和目標特異的 20 nt 向?qū)NA (gRNA),與其相應的MATH-1 CRISPR/Cas9敲除質(zhì)粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特異性
成對的向?qū)NA序列與目標基因中約20個堿基對互補,從而使Cas9可以模仿DNA雙鏈斷裂(DSB),介導特異的基因組DNA雙切割
質(zhì)粒對中的一個包含供篩選使用的嘌呤霉素抗性基因;另一個包含供觀察轉(zhuǎn)染使用的綠色熒光蛋白標記
MATH-1雙切口酶質(zhì)粒(m2)編碼的成對的向?qū)NA與MATH-1雙切口酶質(zhì)粒(m)的編碼的向?qū)NA不同
轉(zhuǎn)染后,基因敲除效率可以用抗體:MATH-1: sc-136173,通過WB, IF或者IHC分析
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CRISPR Activation Plasmids
Description
20 µg 純化的即用型的質(zhì)粒DNA,最多可供20次轉(zhuǎn)染
MATH-1 CRISPER激活質(zhì)粒(m)是一種協(xié)同激活介質(zhì)(SAM)轉(zhuǎn)錄激活系統(tǒng),目的在于特定上調(diào)基因表達
MATH-1 CRISPR激活質(zhì)粒(m)包含三種質(zhì)量比為1:1:1的質(zhì)粒:一種質(zhì)粒編碼去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A),它融合了轉(zhuǎn)錄活化域VP64和殺稻瘟菌素抗性基因;一種質(zhì)粒編碼MS2-p65-HSF1融合蛋白和潮霉素抗性基因;一種質(zhì)粒編碼目標特定的20 nt向?qū)NA和嘌呤霉素抗性基因
形成的SAM復合物結(jié)合到轉(zhuǎn)錄起始位點上游大約200-250 nt的特定位點區(qū)域,為高效激活基因提供轉(zhuǎn)錄因子的招募
MATH-1 CRISPR激活質(zhì)粒(m2)中編碼特異目標的 20 nt 向?qū)NA的單鏈 gRNA (MS2) 質(zhì)粒不同于MATH-1CRISPR激活質(zhì)粒(m)的gRNA
轉(zhuǎn)染后,基因激活效率可以用抗體:MATH-1 Antibody (18A6): sc-136173,通過WB、IF或IHC分析
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Lentiviral Activation Particles
Description
200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
MATH-1 慢病毒激活顆粒(m)是一種協(xié)同激活介質(zhì)(SAM)轉(zhuǎn)錄激活系統(tǒng),通過細胞慢病毒轉(zhuǎn)導,特異高效地上調(diào)目的基因的表達
MATH-1慢病毒激活顆粒(m)包含以下SAM激活元素:一種是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A),它融合了轉(zhuǎn)錄活化域VP64;一種是MS2-p65-HSF1融合蛋白;一種是目標特定的20 nt向?qū)NA。它們還含有殺稻瘟菌素,潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
一經(jīng)轉(zhuǎn)導,形成的SAM復合物結(jié)合到轉(zhuǎn)錄起始位點上游大約200-250 nt的特定位點區(qū)域,為高效激活基因,招募轉(zhuǎn)錄因子
MATH-1 慢病毒激活顆粒(m2)中編碼的特異目標的 20 nt 向?qū)NA的gRNA不同于MATH-1慢病毒激活顆粒(m)中編碼的gRNA
轉(zhuǎn)染后,基因激活效率可以用抗體:MATH-1 Antibody (18A6): sc-136173,通過WB、IF或IHC分析
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