• 
  

• 針對種屬：mouse

• 質粒由來源于 GeCKO (v2)庫的PERQ120 nt向導RNA組成。

• 向導RNA指導Cas9蛋白去誘導基因組DNA中的位點專一的雙鏈破裂（DSB）

• 除慢病毒激活顆粒外，其他產(chǎn)品均為轉染即用型純化DNA質粒。慢病毒激活顆粒預包被成慢病毒顆粒的形式，適用于難被轉染的細胞

CRISPR/Cas9 KO Plasmid

Description
 

• 20 µg 純化的即用型的質粒DNA，最多可供20次轉染

• 為保證最大敲除效率，PERQ1 CRISPR/Cas9 敲除質粒 (m) 包含三個質粒，每個質粒都編碼Cas9 核酶和 PERQ1-特異性20nt向導RNA.

• gRNA 序列來源于 GeCKO (v2)文庫，指導Cas9蛋白去誘導基因組DNA雙鏈中一個特異位點的斷裂。

• 如果需要篩選Cas9成功誘導雙鏈斷裂的細胞，推薦用 PERQ1 HDR質粒(m) (sc-425383-HDR) 共轉染。

• 關于對照抗體的可用性，請聯(lián)系技術服務

 See Protocol Online.

HDR Plasmid

Description
 

• 20 µg 純化的即用型的質粒DNA，最多可供20次轉染

• 推薦用 PERQ1 HDR 質粒 (m) 和 PERQ1 CRISPR/Cas9 KO 質粒 (m) CRISPR/Cas9敲除質粒共轉染 (m)

• PERQ1 HDR 質粒 (m) 包含2-3種質粒，每一種都含有一個同源介導的雙鏈DNA修復（HDR）模板，與 PERQ1 CRISPR/Cas9 KO 質粒 (m) 的剪切位點相對應

• 每個HDR質粒包含兩個800個bp同源臂，可特異地結合到相應的Cas9誘導的雙鏈DNA破壞位點附近的基因組DNA

• 每個HDR質粒中嵌入了一個嘌呤霉素抗性基因，從而能篩選出穩(wěn)定敲除（KO）細胞，以及一個RFP（紅色熒光蛋白）基因，可用于觀察驗證轉染情況

• 嘌呤霉素抗性基因和紅色熒光蛋白基因的兩側是兩個LoxP位點，以便與接下來的Cre Vector sc-418923處理

 See Protocol Online.

Double Nickase Plasmids

Description
 

• 20 µg 純化的即用型的質粒DNA，最多可供20次轉染

• PERQ1 雙切口酶質粒（m）含有一對質粒，分別編碼D10A突變的Cas9核酸酶，和目標特異的 20 nt 向導RNA （gRNA），與其相應的PERQ1 CRISPR/Cas9敲除質粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特異性

• 成對的向導RNA序列與目標基因中約20個堿基對互補，從而使Cas9可以模仿DNA雙鏈斷裂（DSB），介導特異的基因組DNA雙切割

• 質粒對中的一個包含供篩選使用的嘌呤霉素抗性基因；另一個包含供觀察轉染使用的綠色熒光蛋白標記

• PERQ1雙切口酶質粒(m2)編碼的成對的向導RNA與PERQ1雙切口酶質粒(m)的編碼的向導RNA不同

 See Protocol Online.

CRISPR Activation Plasmids

Description
 

• 20 µg 純化的即用型的質粒DNA，最多可供20次轉染

• PERQ1 CRISPER激活質粒（m）是一種協(xié)同激活介質（SAM）轉錄激活系統(tǒng)，目的在于特定上調基因表達

• PERQ1 CRISPR激活質粒（m）包含三種質量比為1:1:1的質粒：一種質粒編碼去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了轉錄活化域VP64和殺稻瘟菌素抗性基因；一種質粒編碼MS2-p65-HSF1融合蛋白和潮霉素抗性基因；一種質粒編碼目標特定的20 nt向導RNA和嘌呤霉素抗性基因

• 形成的SAM復合物結合到轉錄起始位點上游大約200-250 nt的特定位點區(qū)域，為高效激活基因提供轉錄因子的招募

• PERQ1 CRISPR激活質粒（m2）中編碼特異目標的 20 nt 向導RNA的單鏈 gRNA (MS2) 質粒不同于PERQ1CRISPR激活質粒(m）的gRNA

 See Protocol Online.

Lentiviral Activation Particles

Description
 

• 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子

• PERQ1 慢病毒激活顆粒（m）是一種協(xié)同激活介質（SAM）轉錄激活系統(tǒng)，通過細胞慢病毒轉導，特異高效地上調目的基因的表達

• PERQ1慢病毒激活顆粒(m)包含以下SAM激活元素：一種是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了轉錄活化域VP64；一種是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一種是目標特定的20 nt向導RNA。它們還含有殺稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因

• 一經(jīng)轉導，形成的SAM復合物結合到轉錄起始位點上游大約200-250 nt的特定位點區(qū)域，為高效激活基因，招募轉錄因子

• PERQ1 慢病毒激活顆粒（m2）中編碼的特異目標的 20 nt 向導RNA的gRNA不同于PERQ1慢病毒激活顆粒（m）中編碼的gRNA

 See Protocol Online.