詳細說明
針對種屬:mouse
質粒由來源于 GeCKO (v2)庫的Olfr15620 nt向導RNA組成。
向導RNA指導Cas9蛋白去誘導基因組DNA中的位點專一的雙鏈破裂(DSB)
除慢病毒激活顆粒外,其他產品均為轉染即用型純化DNA質粒。慢病毒激活顆粒預包被成慢病毒顆粒的形式,適用于難被轉染的細胞
CRISPR/Cas9 KO Plasmid
Description
20 µg 純化的即用型的質粒DNA,最多可供20次轉染
為保證最大敲除效率,Olfr156 CRISPR/Cas9 敲除質粒 (m) 包含三個質粒,每個質粒都編碼Cas9 核酶和 Olfr156-特異性20nt向導RNA.
gRNA 序列來源于 GeCKO (v2)文庫,指導Cas9蛋白去誘導基因組DNA雙鏈中一個特異位點的斷裂。
如果需要篩選Cas9成功誘導雙鏈斷裂的細胞,推薦用 Olfr156 HDR質粒(m) (sc-424358-HDR) 共轉染。
關于對照抗體的可用性,請聯(lián)系技術服務
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HDR Plasmid
Description
20 µg 純化的即用型的質粒DNA,最多可供20次轉染
推薦用 Olfr156 HDR 質粒 (m) 和 Olfr156 CRISPR/Cas9 KO 質粒 (m) CRISPR/Cas9敲除質粒共轉染 (m)
Olfr156 HDR 質粒 (m) 包含2-3種質粒,每一種都含有一個同源介導的雙鏈DNA修復(HDR)模板,與 Olfr156 CRISPR/Cas9 KO 質粒 (m) 的剪切位點相對應
每個HDR質粒包含兩個800個bp同源臂,可特異地結合到相應的Cas9誘導的雙鏈DNA破壞位點附近的基因組DNA
每個HDR質粒中嵌入了一個嘌呤霉素抗性基因,從而能篩選出穩(wěn)定敲除(KO)細胞,以及一個RFP(紅色熒光蛋白)基因,可用于觀察驗證轉染情況
嘌呤霉素抗性基因和紅色熒光蛋白基因的兩側是兩個LoxP位點,以便與接下來的Cre Vector sc-418923處理
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Double Nickase Plasmids
Description
20 µg 純化的即用型的質粒DNA,最多可供20次轉染
Olfr156 雙切口酶質粒(m)含有一對質粒,分別編碼D10A突變的Cas9核酸酶,和目標特異的 20 nt 向導RNA (gRNA),與其相應的Olfr156 CRISPR/Cas9敲除質粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特異性
成對的向導RNA序列與目標基因中約20個堿基對互補,從而使Cas9可以模仿DNA雙鏈斷裂(DSB),介導特異的基因組DNA雙切割
質粒對中的一個包含供篩選使用的嘌呤霉素抗性基因;另一個包含供觀察轉染使用的綠色熒光蛋白標記
Olfr156雙切口酶質粒(m2)編碼的成對的向導RNA與Olfr156雙切口酶質粒(m)的編碼的向導RNA不同
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CRISPR Activation Plasmids
Description
20 µg 純化的即用型的質粒DNA,最多可供20次轉染
Olfr156 CRISPER激活質粒(m)是一種協(xié)同激活介質(SAM)轉錄激活系統(tǒng),目的在于特定上調基因表達
Olfr156 CRISPR激活質粒(m)包含三種質量比為1:1:1的質粒:一種質粒編碼去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A),它融合了轉錄活化域VP64和殺稻瘟菌素抗性基因;一種質粒編碼MS2-p65-HSF1融合蛋白和潮霉素抗性基因;一種質粒編碼目標特定的20 nt向導RNA和嘌呤霉素抗性基因
形成的SAM復合物結合到轉錄起始位點上游大約200-250 nt的特定位點區(qū)域,為高效激活基因提供轉錄因子的招募
Olfr156 CRISPR激活質粒(m2)中編碼特異目標的 20 nt 向導RNA的單鏈 gRNA (MS2) 質粒不同于Olfr156CRISPR激活質粒(m)的gRNA
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Lentiviral Activation Particles
Description
200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
Olfr156 慢病毒激活顆粒(m)是一種協(xié)同激活介質(SAM)轉錄激活系統(tǒng),通過細胞慢病毒轉導,特異高效地上調目的基因的表達
Olfr156慢病毒激活顆粒(m)包含以下SAM激活元素:一種是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A),它融合了轉錄活化域VP64;一種是MS2-p65-HSF1融合蛋白;一種是目標特定的20 nt向導RNA。它們還含有殺稻瘟菌素,潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
一經轉導,形成的SAM復合物結合到轉錄起始位點上游大約200-250 nt的特定位點區(qū)域,為高效激活基因,招募轉錄因子
Olfr156 慢病毒激活顆粒(m2)中編碼的特異目標的 20 nt 向導RNA的gRNA不同于Olfr156慢病毒激活顆粒(m)中編碼的gRNA
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