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Western blot 中文稱為免疫印跡,實(shí)驗(yàn)過程是將待測蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印到膜上,通常為PVDF膜或者NC膜等,然后利用抗體進(jìn)行檢測的方法,是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。
其基本原理是通過聚丙烯酰胺凝膠電泳分離細(xì)胞或組織樣本中的蛋白,轉(zhuǎn)移到固相載體(如PVDF膜或者NC膜)上,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),且可以保持其分離的多肽類型及生物學(xué)活性不變。蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與相應(yīng)的抗體起免疫結(jié)合,再與辣根過氧化酶(HRP)或者堿性磷酸酶(AP)或同位素標(biāo)記的二抗起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色以檢測電泳分離的特異性目的蛋白表達(dá)情況。該法結(jié)合了凝膠電泳和固相免疫測定兩種技術(shù)的高特異性和高敏感性,可以對目標(biāo)蛋白進(jìn)行定性和半定量的分析。
拓普生物是為生命科學(xué)研究提供一站式專業(yè)服務(wù)的公司,其成立即建立健全的WB平臺,有多個(gè)跑膠系統(tǒng)和轉(zhuǎn)膜系統(tǒng),其中轉(zhuǎn)膜系統(tǒng)包括濕轉(zhuǎn)和半干轉(zhuǎn),可以同時(shí)進(jìn)行多樣本和多蛋白檢測;另外還具備了專業(yè)的技術(shù)人員和實(shí)驗(yàn)監(jiān)控人員,可以對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行嚴(yán)格的把關(guān)。
如下是我們公司的WB平臺的儀器設(shè)備
WB實(shí)驗(yàn)流程:
結(jié)果展示:
WB灰度分析的統(tǒng)計(jì)結(jié)果
Westernblot (WB),Westernblot (WB)
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